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細胞侵襲簡介
細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)侵襲(xi)(xi)實(shi)驗是一種(zhong)體(ti)外(wai)實(shi)驗方法,通(tong)過構建人工基底膜,模(mo)擬體(ti)內(nei)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)外(wai)基質的環境(jing),觀察細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)在此環境(jing)中的侵襲(xi)(xi)能(neng)力。實(shi)驗通(tong)常使用(yong)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)小室,上(shang)室接種(zhong)腫瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao),下室加入趨化因子或完全培養基,通(tong)過檢測細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)穿越基底膜進入下室的數量來反映(ying)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的侵襲(xi)(xi)能(neng)力。
實驗目的
通過細(xi)胞(bao)侵(qin)襲(xi)(xi)(xi)對比實驗(yan),研究(jiu)耐思基(ji)質膠(jiao)和進(jin)口(kou)品牌基(ji)質膠(jiao)在(zai)侵(qin)襲(xi)(xi)(xi)過程(cheng)中侵(qin)襲(xi)(xi)(xi)能力的對比,以及耐思胎牛血清和進(jin)口(kou)胎牛血清在(zai)在(zai)該(gai)實驗(yan)過程(cheng)中的效果(guo)差異,為腫瘤細(xi)胞(bao)的侵(qin)襲(xi)(xi)(xi)機制提供實驗(yan)對比依據。
實驗過程
鋪膠(jiao)→接種(zhong)→培養(yang)→染(ran)色→觀察
1. 按照說明書,用(yong)無血清培養基稀釋基質膠(jiao),加入耐思細胞小室上室,鋪(pu)滿底部進(jin)行孵育成膠(jiao)。
2. 吸出上室(shi)中(zhong)多余液體(ti),使用無血(xue)清培養(yang)基接種細胞,下室(shi)加入完(wan)全(quan)培養(yang)基,放回小室(shi)時注(zhu)意不要產生氣泡。
3. 將細胞小室板放(fang)回37℃、5% 二氧化碳培養(yang)箱中繼續培養(yang)。
4. 棄去上室和(he)下(xia)室的培(pei)養基,使用(yong)PBS清洗上室和(he)下(xia)室。用(yong)棉簽輕(qing)輕(qing)擦去上室中未(wei)侵襲的細胞,加(jia)入固定劑固定30分鐘。晾干(gan)小室,加(jia)入結晶(jing)紫溶(rong)液(ye)染色30分鐘。
5. 棄去結(jie)晶紫溶液,使用PBS清(qing)洗后(hou)晾干小室。
6. 顯微鏡(jing)觀察并拍照記錄(lu)實驗結果。
實驗結果
根據實驗染色結果(guo)可見:
1. 在(zai)侵(qin)襲實驗中,耐思基(ji)質膠與進口(kou)C品牌基(ji)質膠效果無明顯差異;
2. 在侵襲實(shi)驗中,胎(tai)牛(niu)血(xue)清作(zuo)為(wei)影響因子,耐思南(nan)美胎(tai)牛(niu)血(xue)清效(xiao)果(guo)雖(sui)略(lve)低(di)于進(jin)口(kou)G品(pin)(pin)牌胎(tai)牛(niu)血(xue)清,但優于某品(pin)(pin)牌進(jin)口(kou)血(xue)源的(de)胎(tai)牛(niu)血(xue)清;
3. 綜合顯示,在細胞侵(qin)襲實驗中(zhong),耐(nai)思(si)的(de)細胞小(xiao)室、耐(nai)思(si)胎(tai)牛血清、耐(nai)思(si)基質膠等耗材,可以(yi)支持(chi)完(wan)整的(de)侵(qin)襲實驗流程,提供完(wan)善(shan)的(de)耗材支持(chi)。
選購指南
一、細胞小室
二、胎牛血清
三、GelNest?基質膠